V Bus Simulatorju 21 igralec osnuje lastno prevozno družbo v izmišljenem ameriškem mestu Angel Shores ali evropskem Seaside Valley ter dokaže, da je vrhunski voznik avtobusa. Igra vsebuje največ avtobusov v seriji doslej, med drugim uradno licencirane Mercedesove e-avtobuse iz serije eCitara. Sesti je mogoče za volan manjšega, dvanajstmetrskega modela z dvemi vrati ali večjega, ki ima troje vrat in meri osemnajst metrov. Prav tako so tu modeli Citara G, Citara K, najnovejša inačica Citare O 530, CapaCity in podaljšani CapaCity L. Tako kot v prejšnji inačici igre lahko igralec prevozno družbo upravlja sam ali s prijatelji v sodelovalnem spletnem načinu. Bus Simulator 21 vsebuje dvoje razprostranjenih mest, ki omogočata še več vozniške svobode, in številne novosti. Gre za najbolj popolno vozniško in upraviteljsko izkušnjo v seriji doslej!
Edicija Day One vsebuje zunanjosti za avtobuse v paketu USA Skin Pack in notranjosti v paketu Protect Nature Interior Pack.